Морфологические исследования

Проведенные морфологические исследования описаны в статье «Препараты гиалуроновой кислоты в терапии остеоартроза: фокус на Хондрорепарант Гиалрипайер»

Авторы:

В.В. Бадокин; д.м.н., профессор, зав. каф. ревматологии Российской медицинской академии последипломного образования (РМАПО)

Н.П. Михайлова; к.м.н., врач-дерматовенеролог, доцент кафедры кожных болезне и косметологии й̆ и косметологии ФДПО РНИМУ им. Н. И. Пирогова, научный руководитель «Международного научно-исследовательского центра инновационных технологий „МАРТИНЕКС“», действительный член Американской академии дерматологии (AAD) и Американского общества лазерной медицины и ) и Американского общества лазерной медицины и хирургии (ASLMS), врач-дерматовенеролог.

Статья опубликована в журнале «Эффективная фармакотерапия. Ревматология.» 1/2016

В НИИ молекулярной медицины Первый МГМУ им. И.М. Сеченова (Москва) были проведены доклинические исследования:

1. ОЦЕНКА МОРФОЛОГИИ ФИБРОБЛАСТОВ на культурах донорских фибробластов человека.
2. ОЦЕНКА ЭФФЕКТОВ НА ТКАНИ в имплантационном тесте на экспериментальных моделях.
3. АНАЛИЗ ВЛИЯНИЯ ХОНДРОРЕПАРАНТ ГИАЛРИПАЙЕР-02 НА МЕТАБОЛИЧЕСКУЮ АКТИВНОСТЬ И ФАЗЫ КЛЕТОЧНОГО ЦИКЛА на клеточных линиях.
4. ОЦЕНКА ЭФФЕКТОВ НА ТКАНИ в имплантационном тесте на экспериментальных моделях.

В этой серии исследований оценивалось влияние нативной гиалуроновой кислоты и ее стабилизированных формул на биологическую ткань и клеточные линии.

1. При инкубации клеточной культуры без гиалуроната натрия в сравнении с Хондрорепарант ГИАЛРИПАЙЕР-02 выявлены клетки крупных размеров полигональной формы с укороченными отростками, содержащими в цитоплазме эозинофильные включения, отодвигающие ядра к периферии цитоплазмы. Вакуолизация цитоплазмы средней степени (рис. 1 Б).

В опытной группе в присутствии Хондрорепарант ГИАЛРИПАЙЕР-02 (Б) отмечается высокая синтетическая активность клеток по сравнению с контролем без ГК (А), где отмечается низкая синтетической активность клеток.

Таким образом, исследования культуры фибробластов человека продемонстрировало значительное повышение синтетической активности фибробластов в культуре с добавлением Хондрорепарант Гиалрипайер-02 по сравнению с контрольной культурой (без добавления препарата).

2. При инъекционной имплантации Хондрорепарант ГИАЛРИПАЙЕР-02 в толщу соединительной ткани экспериментальных моделей активируется синтез фибробластами нового коллагена, повышается количество новых сосудов с нормальной структурой.

ГИАЛРИПАЙЕР-02. (А) активное образование новых фибрилл коллагена снаружи клеточной стенки фибробласта. (Б) новообразованный капилляр без патологических изменений.

В ходе исследования ученые доказали, что:

• Хондрорепарант ГИАЛРИПАЙЕР-02 оказывает стимулирующий эффект на фибробласты – клетки соединительной ткани.

• Хондрорепарант ГИАЛРИПАЙЕР-02 обладает репаративной активностью при воздействии на соединительную ткань : усиливает синтез матрикса.

3. Исследовались цитокультуры

1. фибробластоподобной линии со свойствами фибробластов соединительной ткани и
2. эндотелиоцитарной линии со свойствами клеток эндотелия сосудов.

Инкубация обоих типов клеток проводилась в течение 24 и 48 часов в присутствии Хондрорепарант ГИАЛРИПАЙЕР-02 (А) и нестабилизированного гиалуроната натрия (Б) в разведениях 0,125–2,0 мг/мл

По сравнению с гиалуронатом натрия при обработке культур Хондрорепарант ГИАЛРИПАЙЕР-02 происходит возрастание числа клеток в фазе синтеза в 2,5 раза. Метаболическая активность фибробластов и эндотелиоцитов при различном времени инкубации была выше в присутствии Хондрорепарант ГИАЛРИПАЙЕР-02, чем в присутствии гиалуроната натрия.

* Стадия S (синтеза) = фаза удвоения ДНК, т.е. подготовка клетки к синтезу белка.

По результатам данного исследования ученые сделали следующие выводы:

• Хондрорепарант ГИАЛРИПАЙЕР-02 оказывает стимулирующий эффект на синтетическую функцию клеток.

• По сравнению с гиалуронатом натрия в присутствии Хондрорепарант ГИАЛРИПАЙЕР-02 клеточные линии проявляют более высокую жизнеспособность и функциональную активность.

4. Была проведена инъекционная имплантация двух препаратов в соединительную ткань животных моделей : 1) неполной формулы твердофазно стабилизированной гиалуроновой кислоты «гиалуронат натрия и аскорбилфосфат без аминокислот» и 2) Хондрорепаранта ГИАЛРИПАЙЕР-02.

Было отмечено, что при инъекционном введении в соединительную ткань Хондрорепарант ГИАЛРИПАЙЕР-02 по сравнению с неполной формулой (без аминокислот) происходит :

1. более выраженная активация синтетической функции фибробластов
2. а также построение межклеточного матрикса.

При введении в соединительную ткань Хондрорепарант ГИАЛРИПАЙЕР-02 находится в ней до 21 суток в виде фрагментов биодеградируемого геля.

По итогам исследования ученые отметили:

• По сравнению с неполной формулой ГИАЛРИПАЙЕР без аминокислот Хондрорепарант ГИАЛРИПАЙЕР-02 обладает выраженной репаративной активностью при воздействии на соединительную ткань : усиливает синтез матрикса.

• Твердофазно стабилизированная гиалуроновая кислота присутствует в тканях до 3-х недель.